黑龙江省猪PCV-Ⅱ血清流行病学调查
发布: 2009-07-10 | 作者: 佚名 |
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张加勇
（黑龙江省兽医卫生防疫站，哈尔滨 150090）
摘要：从哈尔滨、齐齐哈尔、牡丹江、佳木斯、大庆、绥化6个地区的10个猪场抽样采集猪血清368份，其中经产猪血清和后备猪血清各184份，用ELISA进行了PCV-Ⅱ型的感染情况的检测。调查结果表明上述5个地（市）均有不同程度的PCV-Ⅱ型感染，PCV-Ⅱ型血清阳性检测结果为：经产猪检测：哈尔滨87.3%，齐齐哈尔63.0%，牡丹江78.6%，佳木斯53.3%，大庆76.3%，绥化81.0%，平均阳性率为76.6%；后备猪检测：哈尔滨38.2%，齐齐哈尔33.3%，牡丹江28.6%，佳木斯26.7%，大庆26.3%，绥化42.9%，平均阳性率为33.2%；经产猪和后备猪检测总阳性率为55.4%。
关键词：PCV-Ⅱ，血清流行病学，调查
猪圆环病毒（porcinecircovirus，PCV）为圆环病毒科（Circoviridae）圆环病毒属成员。ResellC等根据PCV的致病性及核普酸序列，将其分为两个血清型：将源于PK-15细胞的非致病性PCV称之为PCV-1型，与断奶仔猪多系统消耗综合症（Post-weaningmultisystemicwastingsyndrome，PMWS）密切相关的致病性PCV称为PCV-Ⅱ型。猪是PCV的易感动物，主要是经口腔，呼吸道途径感染，少数怀孕母猪可经胎盘将PCV直接感染给仔猪。感染猪可从鼻液、粪、尿中排出病毒，并于2～15周龄时发生PMWS，最常见于6～8周龄。发病率为4%～10%，病死率可高达50%～100%。成年猪一般为隐性感染，不表现任何症状和病变[1][4]。圆环病毒除引起畜禽机体发生原发感染甚至死亡之外，更严重的是使感染畜禽的免疫功能受到损害，结果导致机体抵抗力下降，易遭受其它病原的并发或继发感染，使病情加重。
1991年，Clark首次报告了在加拿大有本病发生，并命名为断奶猪多系统衰竭综合症PostweoringPigsMultisysWastingSysdrom，PMWS）。1999年PMWS被证实是由一种新的猪圆环病毒（PCV-Ⅱ）引起的。此后，欧美及大洋洲均相继证实了该病的存在和发生。在北美和欧洲猪群中其发病率占被侵袭猪群的5%～10%。2000年，亚洲地区的日本、韩国、中国台湾也有本病存在。经Tischer（1999）等证实，在西班牙、英格兰1986年就已有PMWS。而回顾性检测结果表明：PCV-Ⅱ至少从1969年起就已存在于猪群中。现在，PMWS存在于世界各国的养猪地区，而与之有关的疾病包括猪繁殖障碍也将可能对全球养猪业造成巨大的经济损失。
我国的朗洪武（2000，2001）、曹胜波（2001）、王忠田（2002年）、孙泉云（2003）、李鹏（2004）、陈义祥（2005）先后分别通过血清学调查及PCR在河北、北京、山东、天津、吉林、江苏、上海、河南、湖北、广东、江西、山西、广西等地检测到了PCV-2。近年来，我国内地有关PMWS的报道越来越多，PMWS已在我国广泛流行。为了解黑龙江省规模化猪场PCV-Ⅱ的流行情况，黑龙江省动物卫生监督所对全省6个地（市）10个种猪场抽样采集血清368份，采用ELISA方法进行了猪圆环病毒（PCV）抗体检测。
1 材料和方法
1.1材料
1.1.1待检猪血清：从哈尔滨、齐齐哈尔、牡丹江、佳木斯、大庆、绥化6个地区的10个猪场抽样采集猪血清368份，其中经产猪血清和后备猪血清各184份，冷冻保存。
1.1.2猪圆环病毒病ELISA诊断试剂盒，由华中农业大学畜牧兽医学院提供。
1.1.3仪器：酶标仪（318MC型），单道微量可调移液器，八道微量可调移液器，Sigma低温高速离心机。
1.2操作步骤
1.2.1取预包被的微孔板，用洗涤液洗板3次，200μL/孔，每次静置3分钟倒掉，最后一次拍干。除空白对照孔外，每孔加入以样品稀释液1：40稀释的待检样品，每孔加100μL，同样1：40稀释对照血清，设阳性对照2孔，阴性对照2孔，空白孔不加血清，轻轻振匀孔中样品，置37℃温育30min。
1.2.2甩掉板孔中的溶液，用洗涤液洗板3次，200μl/孔，每次静置3min倒掉，最后一次拍干。
1.2.3每孔加酶标二抗100μL，置37℃温育30min。
1.2.4洗涤4次，方法同1.2.2。
1.2.5每孔加底物A液、B液各1滴（50μL），室温避光显色15min。
1.2.6每孔加终止液1滴（50μL），15min内使用酶标仪OD630测定结果。
1.2.7结果判定：以空白孔调零，在酶标仪上测各孔OD630值，若待测孔OD630≥0.4则判为阳性，反之，则为阴性。
2 结 果
2.1对哈尔滨、齐齐哈尔、牡丹江、佳木斯、大庆、绥化6个地区10个猪场抽样采集的368份猪血清进行PCV-Ⅱ检测结果为：经产猪检测：哈尔滨87.3%，齐齐哈尔63.0%，牡丹江78.6%，佳木斯53.3%，大庆76.3%，绥化81.0%，平均阳性率为76.6%；后备猪检测：哈尔滨38.2%，齐齐哈尔33.3%，牡丹江28.6%，佳木斯26.7%，大庆26.3%，绥化42.9%，平均阳性率为33.2%；经产猪和后备猪检测总阳性率为55.4%。见表1。
表1 黑龙江省猪场PCV-Ⅱ检测结果
地区
检测数
(头份)
经产母猪(头份)
后备母猪(头份)
阳性数(只)
阳性率(%)
阳性数(只)
阳性率(%)
哈尔滨
110
96
87.3
42
38.2
齐齐哈尔
54
34
63.0
18
33.3
牡丹江
56
44
78.6
16
28.6
佳木斯
30
16
53.3
8
26.7
大庆
76
58
76.3
20
26.3
绥化
42
34
81.0
18
42.9
合计
368
282
76.6
122
33.2
2.2从对哈尔滨等6个地市的PCV-Ⅱ的检测结果可以看出，哈尔滨地区被检验猪的阳性率最高，而大庆地区被检验猪的阳性率最低，这可能与饲养数量、抽检数量、气候有关。
3分析与讨论
3.1根据朗洪武等对国内7省（市）22个猪群的559份血清PCV-Ⅱ检测结果，后备母猪阳性率43.3%，经产母猪阳性率85.6%，总阳性率42.9%，并且PCV感染比例随着猪年龄增长而升高。从本次PCV-Ⅱ检测结果看出，经产母猪阳性率偏高，污染最高的地区达到了87.3%，抽查检验猪的总阳性率为55.4%，表明PCV-Ⅱ已经对我省的养猪业构成潜在危害，应当引起养猪场和动物卫生部门的重视。
3.2我们在检测中发现，PCV阳性率与伪狂犬病、猪繁殖与呼吸综合症感染率有一定的相关性，在PCV阳性率偏高的猪群中，伪狂犬病和猪繁殖与呼吸综合症的阳性率也偏高，这可能与圆环病毒除引起畜禽机体发生原发感染甚至死亡之外，更严重的是使感染畜禽的免疫功能受到损害，结果导致机体抵抗力下降，易遭受其它病原的并发或继发感染，使病情加重有关。但PCV的发病机理以及与伪狂犬病、猪繁殖与呼吸综合症等疾病的相关性还有待于进一步研究。
3.3此病的诊断必须将临床症状、病理变化和实验室的病原或血清抗体检测等相结合，才能得到可靠的结论。据临床症状和病理变化只能做出初步诊断，确诊必须依靠实验室诊断技术。崔尚金（2006）建立了检测与诊断猪圆环病毒的PCR方法，并对该方法进行了标准化研究。该方法可以区分PCV-1和PCV-2，对其它病原微生物如猪繁殖与呼吸综合征、猪细小病毒病以及许多细菌不能检出。农业部兽医诊断中心建立了PCR方法，并已组装商品化试剂盒应用于PCV-Ⅱ的诊断。
3.4PMWS病程发展缓慢，猪群一次发病持续12～18个月之久，由于其可引起仔猪的高死亡率，控制该病已成为养猪生产面临的新问题。虽然已明确PCV-Ⅱ是PMWS的原发病因，但在致病性上，仍需要一些其他因素或病原体才能诱导与PMWS相关的临床症状和病理变化。一方面，具有协同作用的病原体感染、免疫刺激、环境因素及其他应激因素可诱发PCV-Ⅱ的感染；另一方面，PCV-Ⅱ的感染又可导致免疫抑制，而使猪不能激发对其他病原体的有效的免疫应答。虽然已有研究表明，初乳母抗对仔猪PMWS有一定预防作用，通过主动免疫或被动免疫可对仔猪有保护作用，但至今没有有效的疫苗可以用于PMWS预防，并且，由于PCV-Ⅱ的独特致病性，近期内开发和研制有效疫苗也不现实。由于PCV的广泛存在，人们又对其传播方式、致病机理、免疫应答机制等方面了解得并不详细，临床上所采取的兽医卫生管理措施没有明显的效果。抗生素对PMWS患猪无效，但抗生素的使用和良好的饲养管理，有助于控制二重感染。因此，目前控制PMWS的重点应是控制继发感染，减少猪只死亡，降低经济损失，并在充分了解该病流行病学及其病原学的基础上，加大对PCV的研究投入及研究力度，尽早研制出控制该病继续蔓延的有效方案。
参考文献
[1]王天奇，等.断奶仔猪多系统消耗综合征的流行及控制.河南科技大学学报（农学版），2004，24(1)：13~16.
[2]戴益民，等。猪圆环病毒病(PCVD)研究进展。动物科学与动物医学。2003，20(10)：38~40.
[3]郎洪武，等.断奶猪多系统衰弱综合征血清抗体检测［J］.中国兽医科技，2000，30(3):3~5.
[4]杨汉春.猪断奶后多系统衰弱综合征的控制策略［J］.中国兽医杂志，2002，38(11):46~47.
[5]刘正飞，等.猪圆环病毒研究进展［J］.动物医学进展，2002，23(2):14~17.
[6]崔尚金，等.猪断奶后多系统衰竭综合征诊断方法的系列研究.中国预防兽医学报，2004，26(2):146~149.
张加勇（1977～），男，黑龙江兰西人，兽医师，在职硕士，从事动物疫病监测与控制工作。
