猪人工受精操作流程
发布: 2011-09-17 | 作者: | 来源:
人工授精站实验室是精液检查、处理、贮存的场所，为了生产出优质的、符合输精要求的精液，一定把好质量关，保证出站的每一瓶精液的活力不低于0.7，72小时之内保存活率不受影响,特对实验室日常运作做如下规定。
1、实验室要求整洁、干净、卫生，每周彻底清洁一次；
2、非实验室工作人员在正常情况下不准进入实验室，采精员也不准进入实验室；
3、所有仪器设备应在仔细阅读说明书后，由专人按操作规程使用和维护保养；特别是高压蒸气灭菌器，超声波洗净器，双蒸水器使用时更应注意人身安全；
4、各种电器设备应按其要求选择适应插座，除冰箱、精液保存箱、恒温培养箱等外，一般电器要求人走断电，干燥箱无人时设定温度不应高于100℃；
5、物品、器皿的清洗、消毒方法：所有器皿应以洗洁精或洗衣粉清洗干净，再以蒸馏水漂洗，60℃干燥（玻璃用品干燥温度可高于100℃）后，以锡纸包扎器皿开口，玻璃器皿180℃ 1小时进行干热灭菌，非耐热器皿、用具以高压灭菌器121℃、20分钟湿热灭菌；
6、稀释液的配制、精液检查、稀释、分装一定按照人工授精操作规程进行；
7、实验室仪器设备保持清洁卫生：实验室内使用的仪器设备，如显微镜、干燥箱、水浴锅、17℃精液保存箱、冰箱、37℃恒温板、电子天平等，必然保持清洁卫生，显微镜镜头（目镜和物镜），应每２周用二甲苯浸泡一次，保持清洁；
8、采精室与实验室之间的传递口的两测窗只有在传递物品时才能按先后顺序开启使用；
9、实验室地板、实验台保持干净清洁；
10、下班离开实验室前一定检查电源、水龙头、门、窗是否关闭好，做到万无一失方可离开实验室，确保安全；
11、防火防盗，注意安全。
采精的操作规程
1、采精员一手带双层手套，另一手持37℃保温杯(内装1次性食品袋)用于收集精液；
2、饲养员将待采精的公猪赶至采精栏，用0.1%高锰酸钾溶液清洗其腹部和包皮，再用温水（夏天用自来水）清洗干净，避免药物残留对精子的伤害；
3、采精员挤出公猪包皮积尿，按摩公猪包皮部，刺激其爬跨假台畜；
4、公猪爬跨假台畜并逐步伸出yin茎，脱去外层手套，将公猪yin茎龟头导入空拳；
5、用手（大拇指与龟头相反方向）紧握伸出的公猪yin茎螺旋状龟头，顺其向前冲力将yin茎的“s’’状弯曲拉直，握紧yin茎龟头防止其旋转，公猪即可射精；
6、用四层沙布过滤收集浓份精液于保温杯内的一次性食品袋内，最初射出的少量精液含精子很少，可以不必接取，有些公猪分2-3个阶段将浓份精液射出，直到公猪射精完毕，射精过程历时5-7分钟；
7、采精员应注意安全，一旦公猪出现攻击行为，采精员应立刻逃至安全角；
8、下班之前彻底清洗采精栏；
9、采精期间不准欧打公猪，防止出现性抑制；
10、采精频率：成年公猪每周2次，青年公猪（1岁左右）每周1次。最好固定每头公猪的采精频率；
11、公猪采精调教：①后备公猪7月龄开始进行采精调教；②每次调教时间不超过15分钟；③一旦采精获得成功，分别在第2、3天再采精1次，进行巩固掌握该技术；④采精调教可采用发情母猪诱导、观摩有经验公猪采精、以发情母猪分泌物刺激等方法；⑤调教公猪要有耐心，不准打骂公猪；⑥注意公猪和调教人员的安全。
稀释液配制操作规程
1、配制稀释液的药品要求选用分析纯试剂，对含有结晶水的试剂要按摩尔浓度进行换算（如含水葡萄糖和无水葡萄糖）；
2、按稀释液配方，用称量纸、电子天平准确称量药品；
3、按1000ml、2000ml剂量称量稀释粉，置于密封袋中；
4、使用前将称量好的稀释粉溶于定量的双蒸水中，可用磁力搅拌器助其溶解；
5、用滤纸过滤，以尽可能除去杂质；
6、用1n稀盐酸或1n氢氧化钠调整bts稀释液的ph值为7.2(6.8-7.4)左右,渗透压为330mosm；稀释液配好，应及时贴上标签，标明品名、配制日期和时间、经手人等；
7、要认真检查已配制好的稀释液成品，发现问题及时纠正；
8、液态状稀释液冰箱4℃保存，不超过24小时，超过有效贮存期的变质稀释液应废弃。
精液质量的检查操作规程
1、精液量：以电子天平称量精液，按每克1毫升计，避免以量筒等转移精液盛放容器的方法测量精液体积；
2、颜色：正常的精液是乳白色或浅灰白，精子密度越高，色泽愈浓，其透明度愈低。如带有绿色或黄色是混有脓液或尿液，若带有淡红色或红褐色是含有血液。这样的精液应舍弃不用，会同兽医寻找原因；
3、气味：猪精液略带腥味，如有异常气味，应废弃；
4、ph值（酸碱度）：以ph计测量（ph计使用见说明书）；
5、精子活率检查：活率是指呈直线运动的精子百分率，在显微镜下观察精子活率，一般按0.1-1.0 的十级评分法进行，鲜精活率要求不低于0.7；
6、精子密度：指每毫升精液中所含的精子数，是确定稀释倍数的重要指针。要求用血细胞计数板进行计数或精液密度仪测定。血细胞计数板计数方法：①以微量加样品取具有代表性原精液100μl，3%nac l900μl,混匀，使之稀释10倍；②在血细胞计数室上放一盖玻片，取1滴上述精液放入计数板的槽中，靠虹吸将精液吸入计数室内；③在高倍镜下计数5个中方格内的精子总数，将该数乘以50万，即得原精液每毫升的精子数（即精液密度）。精液密度仪使用见其说明书；
7、精子畸形率：畸形率是指异常精子的百分率，一般要求畸形率不超过18％，其测定可用普通显微镜,但需伊红或姬姆沙染色,相差显微镜可直接观察活精子的畸形率,公猪使用过频或高温环境会出现精子尾部带有原生质滴的畸形精子;畸形精子种类很多,如:巨型精子、短小精子、双头或双尾精子，顶体膨胀或脱落、精子头部残缺或与尾部分离、尾部变曲。要求每头公猪每两周检查一次精子畸形率；
8、按要求做好精液质量检查登记表；
9、实事求是地填写种公猪健康状况登记表，从而真实地反应种公猪健康状况。
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